Condividere:
Tipi di test biochimici, per cosa servono e importanza
il test biochimici in microbiologia sono una serie di test chimici che vengono effettuati sui microrganismi presenti in un campione al fine di identificarli; Questi microrganismi sono solitamente batteri. C'è un gran numero di test biochimici disponibili per un microbiologo.
Tuttavia, la scelta di questi test si basa su risultati preliminari, come il pattern di colorazione Gram e caratteri di crescita, che consentono di assegnare i batteri a una particolare categoria. I test biochimici si basano principalmente sulle proprietà metaboliche di ciascun tipo di batterio.
Non tutti i batteri hanno le stesse proprietà, quindi viene studiato se hanno un particolare enzima aggiungendo il substrato e aspettando che la reazione si verifichi. Comunemente questa determinazione è data da un cambiamento di colore o pH nel mezzo di coltura.
Spesso sono necessari meno di 15 test biochimici per l'identificazione affidabile di un batterio fino al livello di specie. L'esecuzione di più test biochimici può aumentare la fiducia nell'identificazione.
La maggior parte di questi test biochimici viene effettuata su siero o plasma sanguigno. Tuttavia, possono anche essere eseguiti in altre secrezioni biologiche come: urina, liquido cerebrospinale, liquido pleurico e feci, tra gli altri.
indice
- 1 Classificazione
- 1.1 Universale
- 1.2 Differenziali
- 1.3 Specifico
- 2 tipi di test biochimici
- 2.1 Il test della catalasi
- 2.2 Il test dell'ossidasi
- 2.3 Test sugli agar di mannitolo salato (MSA)
- 2.4 Test della coagulasi
- 2.5 Il test dell'ureasi
- 3 A cosa servono i test biochimici?
- 4 Importanza
- 5 riferimenti
classificazione
I test biochimici possono essere classificati in 3 gruppi:
universale
Sono i test che possono essere eseguiti su qualsiasi campione e che guidano il microbiologo sui seguenti test biochimici che devono essere eseguiti per ottenere un'identificazione affidabile.
esempio
Il test della catalasi e dell'ossidasi.
differenziali
Questi sono i test che vengono effettuati per identificare i microrganismi presenti nel campione fino al livello di specie.
L'identificazione viene effettuata sulla base dei risultati di una combinazione di test, dal momento che i singoli risultati non sono sufficientemente istruttivi da rendere l'identificazione.
esempio
Test IMViC e test di utilizzo dello zucchero.
specifico
Sono test specifici per un particolare gruppo di specie o per sottotipo una specie. Questi test vengono solitamente eseguiti per confermare o identificare a livello di sottospecie. I singoli test sono di per sé informativi.
esempio
Il test γ-Glutamilamminopeptidasi.
Tipi di test biochimici
Il test della catalasi
Il test della catalasi è un test per dimostrare la presenza dell'enzima catalasi mediante la decomposizione del perossido di idrogeno in ossigeno e acqua. Una piccola quantità di batteri viene aggiunta a una goccia di perossido di idrogeno (3%) sul vetrino.
Il test della catalasi è un semplice test utilizzato dai microbiologi per aiutare a identificare le specie batteriche e per determinare la capacità di alcuni microbi di abbattere il perossido di idrogeno producendo l'enzima catalasi.
Se si osservano bolle di ossigeno significa che il batterio possiede l'enzima catalasi, poiché catalizza la decomposizione del perossido di idrogeno in ossigeno e acqua. Si dice quindi che l'organismo è catalasi positivo (ad esempio: Staphylococcus aureus).
Il test dell'ossidasi
Questo test viene utilizzato per identificare i microrganismi che contengono l'enzima citocromo ossidasi (importante nella catena di trasporto degli elettroni). È comunemente usato per distinguere tra le famiglie Enterobacteriaceae e Pseudomadaceae.
La citocromo ossidasi trasferisce gli elettroni dalla catena di trasporto degli elettroni all'ossigeno (l'accettore finale di elettroni) e lo riduce all'acqua. Nel test dell'ossidasi sono fornite molecole di donatori e donatori artificiali di elettroni.
Quando il donatore di elettroni viene ossidato dall'azione della citocromo ossidasi, il terreno diventa viola scuro ed è considerato un risultato positivo. Il microrganismo Pseudomonas aeruginosa è un esempio di un batterio ossidasi positivo.
Salar Mannitol Agar Test (MSA)
Questo tipo di test è sia selettivo che differenziale. La MSA selezionerà organismi in grado di vivere in ambienti con alte concentrazioni di sale, come le specie di Staphylococcus in contrasto con la specie di streptococco, la cui crescita è inibita in queste condizioni.
Il componente differenziale in questo test è zucchero mannitolo. Gli organismi capaci di usare il mannitolo come fonte di cibo producono sottoprodotti della fermentazione, che sono acidi e, quindi, abbassano il pH del mezzo.
L'acidità del terreno fa diventare giallo l'indicatore di pH, rosso fenolo. Esempi di specie batteriche che possono essere differenziati da questo metodo sono: Staphylococcus aureus (positivo perché ferisce il mannitolo) e Staphylococcus epidermidis (negativo perché il mannitolo non fermenta).
Test della coagulasi
La coagulasi è un enzima che aiuta a coagulare il plasma sanguigno. Questo test viene eseguito su batteri positivi al gram-positivo e catalasi positivi da identificare Staphylococcus aureus (coagulasi positiva). Infatti, la coagulasi è un fattore di virulenza di questa specie batterica.
La formazione di coaguli intorno a un'infezione causata da questo batterio probabilmente la protegge dalla fagocitosi. Questo test è molto utile quando vuoi differenziare Staphylococcus aureus di altre specie di Staphylococcus che sono coagulasi negativa
Il test dell'ureasi
Questo test viene utilizzato per identificare i batteri in grado di idrolizzare l'urea, utilizzando l'enzima ureasi. È comunemente usato per distinguere il genere Proteus di altri batteri enterici.
L'idrolisi dell'urea produce ammoniaca come uno dei suoi prodotti. Questa base debole aumenta il pH del terreno sopra 8.4 e l'indicatore di pH (rosso fenolo) cambia da giallo a rosa. Un esempio di un batterio ureasi positivo è Proteus mirabilis.
A cosa servono i test biochimici?
I test biochimici in microbiologia vengono utilizzati per diagnosticare malattie causate da microbi e per monitorare i trattamenti somministrati per combatterli. Inoltre, sono utilizzati per lo screening delle malattie infettive e per la loro prognosi.
L'identificazione biochimica dei microrganismi offre un'idea di ciò che questi microrganismi sono in grado di fare, essendo possibile la discriminazione di diversi ceppi della stessa specie da specifici profili biochimici.
Le differenze nelle specifiche attività enzimatiche informano sull'ecologia, la fisiologia o l'habitat naturale del microrganismo, che in alcuni casi può essere considerato un'informazione importante.
importanza
Le differenze strutturali rispetto alla forma, alle dimensioni e alla disposizione dei batteri aiutano molto poco nel processo di identificazione, perché ci sono molte specie di batteri che hanno forma, dimensioni e disposizione simili.
Per questo motivo, in ultima analisi, l'identificazione dei batteri si basa principalmente sulle differenze nelle loro attività biochimiche.
Ogni specie di batteri ha un insieme ben definito di attività metaboliche diverse da tutte le altre specie. Queste "impronte digitali" biochimiche sono proprietà controllate dagli enzimi batterici.
Pertanto, i test biochimici sono importanti perché aiutano il ricercatore a identificare correttamente i patogeni presenti in un campione e, in questo modo, a essere in grado di raccomandare il trattamento appropriato al paziente.
riferimenti
- Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Biochimica clinica (8 ° ed.). Wiley-Blackwell.
- Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Metodi biochimici per batteriologia. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
- Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. e O'Reilly, J. (2013). Biochimica clinica (5 ° ed.). Elsevier Health Sciences.
- Goldman, E. & Green, L. (2008). Manuale pratico di microbiologia (2 ° ed.). Stampa CRC.
- Harrigan, W. (1998). Metodi di laboratorio in microbiologia alimentare (3 ° ed.). Stampa accademica.
- Vasanthakumari, R. (2009). Microbiologia pratica. BI Publications Pvt Ltd.