Cos'è Simple Staining? Funzionalità principali

il semplice colorazione È una procedura di colorazione rapida e semplice in cui viene utilizzato un singolo colorante, per questo è chiamato semplice. Viene principalmente utilizzato per determinare la morfologia e l'organizzazione delle cellule presenti in un campione.

Naturalmente le cellule non hanno colore, quindi è necessario renderle visibili in qualche modo quando vengono osservate al microscopio.

È importante sottolineare che i coloranti utilizzati nella colorazione semplice devono essere basici con una carica positiva (cationica), in modo che possano legarsi spontaneamente alla parete cellulare e al citoplasma.

Queste strutture cellulari sono caricate negativamente. Questo è il motivo per cui la tintura, caricata positivamente, è attratta dalle cellule e si lega spontaneamente a loro. Pertanto, tutte le cellule presenti in un campione vengono colorate rapidamente.

Coloranti usati nella semplice colorazione

Esistono diversi coloranti di base che possono essere utilizzati nel laboratorio di microbiologia. I più usati sono:

- Blu di metilene.

- Cristallo viola.

- Verde malachite.

- Fuchsin di base.

Tutti questi coloranti funzionano bene nei batteri perché hanno ioni colorati (cromofori) a carica positiva (cationici).

I tempi di colorazione per la maggior parte di questi coloranti sono relativamente brevi. Di solito vanno da 30 secondi a 2 minuti, a seconda dell'affinità della tintura.

È importante ricordare che prima di tingere un campione con una semplice colorazione, deve essere esteso e fissato al vetrino (vetrino); Il campione esteso e fisso è chiamato striscio.

I 6 passaggi per eseguire una semplice colorazione

Passaggio 1

Posizionare la diapositiva su una rastrelliera e applicare la tinta desiderata. Lascia agire il tempo corrispondente.

Normalmente, la colorazione semplice richiede alcuni secondi o un paio di minuti, a seconda del colorante utilizzato.

osservazione

In questa fase è importante non superare il tempo raccomandato per la tintura utilizzata, poiché i cristalli potrebbero formarsi sul foglio, producendo quelli che sono noti come "artefatti" che distorcono la morfologia delle cellule.

Passaggio 2

Lavare accuratamente lo striscio del vetrino con acqua distillata da una bottiglia, o anche con acqua del rubinetto che scorre lentamente, fino a quando il deflusso diventa trasparente. Questo richiede in genere da 5 a 10 secondi.

osservazione

Non applicare il getto d'acqua direttamente sullo striscio, per evitare che la forza dello stesso danneggi il campione.

Se non si dispone di acqua distillata, è possibile utilizzare l'acqua del rubinetto senza alcun problema in quanto non influenzerà il risultato della colorazione.

Passaggio 3

Asciugare il vetrino con assorbenti di carta in un'unica direzione e senza sfregare. Assicurati che la parte inferiore del vetrino sia pulita.

Passaggio 4

Osservare lo striscio macchiato sul microscopio. Inizia con gli obiettivi più distanti per localizzare correttamente l'area che desideri osservare più in dettaglio. Cambio di obiettivo per avvicinarsi sempre di più al campione.

osservazione

Per l'uso della lente con l'ingrandimento più alto (normalmente 100X) si dovrebbe usare l'olio da immersione, poiché aiuta la luce a penetrare meglio e l'immagine ad essere più nitida. Non è necessario usare un coprioggetto.

Passaggio 5

Infine, scartare tutti i campioni in un contenitore appropriato etichettato correttamente "rischio biologico".

riferimenti

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